层析法

层析法中硅胶的用量主要取决于实验的具体需求和样品的性质。以下是一些关键点和参考数据：

样品与硅胶的比例

样品与拌样的硅胶比例通常为1:2到1:3。

对于大柱子，拌好的样硅胶量与空白硅胶量的比例约为1:5；对于小柱子，这个比例则为1:10-20。

样品与硅胶的比例也可以大约为1:20-30，但加大硅胶的用量可能会提高分离效果，同时也会增加样品的死吸附。

硅胶的目数

柱层析常用的硅胶目数为200-300目。

硅胶的称量

称量硅胶时，一般称30~70倍于上样量。如果样品特别难分离，也可以使用100倍量以上的硅胶。

例如，对于1-2g的上样量，可以使用50g的200-300目硅胶。

柱子的填充

在装柱时，可以根据实验所需柱子的高度来调整硅胶的使用量，以节省硅胶并避免浪费。

建议

根据样品性质调整：首先需要了解样品的性质，如极性、分子量等，以便选择合适的硅胶比例和目数。

从小剂量开始：通常建议从样品与硅胶比例为1:2或1:3开始，逐步调整至最佳效果。

考虑分离效果与死吸附的平衡：增加硅胶用量可以提高分离效果，但也会增加样品的死吸附，因此需要找到一个平衡点。

使用梯度洗脱：如果可能，可以使用梯度洗脱来优化分离效果，减少死吸附的影响。

通过以上方法和注意事项，可以有效地进行层析法实验，获得理想的分离效果。